The human follicle stimulating hormone (hFSH) keeps the normal ultrastructure of caprine preantral follicles cultured in vitro

Abstract

The aim of this study was to investigate the effects of human follicle stimulating hormone (hFSH) on the in vitro culture of caprine preantral follicles. Fragments of goat ovarian cortex were cultured in α-MEM + supplemented with 0, 10, or 50 ng/mL hFSH for one or seven days. Small fragments of non-cultured and cultured ovarian tissue were processed for classic histology and transmission electron microscopy. The statistical tests used in this study were Lilliefors, Cochran, and Tukey’s (when significance was detected, PROC ANOVA, SAS was used). The results revealed a reduction in the percentage of normal follicles after one or seven days of culture under all treatment conditions. The rates of follicular survival were similar to each other, within each day of culture. The medium containing 10 ng/mL hFSH reduced the percentage of primordial follicles following culture for one and seven days and did not increase the percentage of developing follicles. The follicular diameter of ovarian tissue cultured in α-MEM + medium and medium supplemented with 10 ng/mL of hFSH did not change when compared with the control (non-cultured). The ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles cultured for seven days in medium containing 10 ng/mL hFSH. In conclusion, hFSH (10 ng/mL) is capable of promoting the activation of primordial follicles and maintaining the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles cultured in vitro for seven days.

O objetivo desse estudo foi investigar os efeitos do FSH humano (hFSH) no cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos. Fragmentos do córtex ovariano de caprinos foram cultivados em ?-MEM+ suplementado com 0, 10, ou 50 ng/mL de hFSH por um ou sete dias. Pequenos fragmentos de tecido ovariano cultivado e não cultivados, foram processados por histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Os testes estatísticos utilizados na pesquisa foram Lilliefors, Cochran, e Tukey’s (caso significância - PROC ANOVA; SAS). Os resultados mostraram uma redução no percentual de folículos normais, após um ou sete dias de cultivo em todas as condições de tratamento. As taxas de sobrevivência folicular foram semelhantes entre si, dentro de cada dia de cultivo. O meio contendo 10 ng/mL de hFSH reduziu a percentagem de folículos primordiais no dia um e sete de cultivo, e não aumentou a percentagem dos folículos em desenvolvimento. O diâmetro folicular de tecido ovariano cultivado em meio ?-MEM+ e meio suplementado com 10 ng/mL de hFSH não alterou, quando comparado com o controle (não cultivado). As análises ultraestruturais confirmaram a integridade de folículos cultivados por sete dias em meio contendo 10 ng/mL de hFSH. Em conclusão, o hFSH (10 ng/mL) é capaz de promover a ativação de folículos primordiais e manter a integridade ultraestrutural de folículos préantrais caprinos cultivados in vitro por até sete dias.