Locus  

Expressão do peptídeo vacina SBm7462® anti-carrapato Rhipicephalus microplus em plantas transgênicas (Arabidopsis thaliana)

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dc.creator Peconick, Ana Paula
dc.date.accessioned 2015-03-26T12:47:42Z
dc.date.available 2015-02-13
dc.date.available 2015-03-26T12:47:42Z
dc.date.issued 2010-02-26
dc.identifier.citation PECONICK, Ana Paula. Expression of the peptide vaccine SBm7462® anti-tick Rhipicephalus microplus in transgenic plants (Arabidopsis thaliana). 2010. 95 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia, diagnóstico e controle de doenças; Epidemiologia e controle de qualidade de prod. de) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2010. por
dc.identifier.uri http://locus.ufv.br/handle/123456789/1433
dc.description.abstract A demanda por vacinas parasitárias em saúde animal é crescente. Os prejuízos causados pela infestação de carrapatos e as doenças transmitidas pelos mesmos estão na ordem de bilhões de dólares, sendo o carrapato Rhipicephalus microplus o parasito de maior impacto econômico na pecuária do Brasil e dos países com clima tropical e subtropical. Pesquisas de ponta, aplicando ferramentas de biotecnologia, são usadas em alguns ou em todos os estágios no desenvolvimento de vacinas. A produção de proteínas heterólogas é uma promissora alternativa para a fabricação de vacinas. Os vegetais representam um dos sistemas mais econômicos para a produção em larga escala de proteínas para uso industrial e farmacêutico, o que significa utilizar as plantas como biofábricas. O objetivo do presente trabalho é produzir antígenos vacinais homólogos do peptídeo sintético SBm7462® contra o carrapato R. microplus, em plantas (Arabidopsis thaliana) transformadas com gene sintético. O gene denominado seq2, que possui a seqüência da SBm7462® repetida três vezes em tandem foi inserido em vetores de doação (pDONR201) e, em seguida, em vetores de expressão binário para plantas (pk7WG2 e o pk7FWG2), utilizando-se o sistema Gateway®. Pela seleção em meio com antibiótico e reação em cadeia de polimerase (PCR), selecionaram-se as plantas transformadas positivamente, a presença do transgene nessas foi confirmado por sequenciamento genético. As plantas transgênicas com melhor desenvolvimentoapresentaram o gene seq2 integrado ao seu genoma. Para avaliar a expressão do peptídeo recombinante foram realizadas as técnicas de RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction), imunohistoquímica e análise em microscópio confocal. As proteínas recombinantes denominadas rBm7462 foram expressas no apoplasto das células epidérmicas das folhas transgênicas. As plantas com os maiores níveis de expressão foram selecionadas para, nas próximas gerações, imunizar camundongos BALB/c. Esse é o primeiro estudo da produção de subunidades vacinais em plantas transgênicas contra um ectoparasito. pt_BR
dc.description.abstract The demand for parasitic vaccines in animal health is growing. The damage due to infestation of ticks and diseases transmitted by them are in the billions of dollars, and the tick Rhipicephalus microplus parasite of the greater economic impact on livestock in Brazil and in countries with tropical and subtropical climates. Advanced research projects, applying tools of biotechnology are used in some or all stages in the development of vaccines. The production of heterologous proteins is a promising alternative for the manufacture of vaccines. The plants represent one of the most economical for large-scale production of proteins for industrial and pharmaceutical, which means using plants as biofactories. The objective of this work is to produce vaccine antigens homologous synthetic peptide SBm7462® against the tick R. microplus in plants (Arabidopsis thaliana) transformed with synthetic gene. The gene seq2, which has the sequence SBm7462® repeated three times in tandem was inserted into donor vector (pDONR201) and then in binary expression vectors for plants (pk7WG2 and pk7FWG2), using the Gateway® system. By selection in medium with antibiotics and polymerase chain reaction (PCR) were selected as positively transformed plants, the presence of these transgene was confirmed by genetic sequencing. Transgenic plants with improved development presented seq2 gene integrated in its genome. To evaluate the expression of the recombinant peptide were carried out RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction), immunohisto chemistry and confocal microscope analysis. The recombinant proteins were expressed rBm7462 the apoplast of epidermal cells of transgenic leaves. Plants with the highest levels of expression were selected for new generations, to immunize BALB/c. This is the first study of the production of subunit vaccine in transgenic plants against an ectoparasite. eng
dc.description.sponsorship Universidade Federal de Lavras
dc.format application/pdf por
dc.language por por
dc.publisher Universidade Federal de Viçosa por
dc.rights Acesso Aberto por
dc.subject Vacinação por
dc.subject Proteínas heterólogas por
dc.subject Plantas transgênicas por
dc.subject Vaccination eng
dc.subject Heterologous proteins eng
dc.subject Transgenic plants eng
dc.title Expressão do peptídeo vacina SBm7462® anti-carrapato Rhipicephalus microplus em plantas transgênicas (Arabidopsis thaliana) por
dc.title.alternative Expression of the peptide vaccine SBm7462® anti-tick Rhipicephalus microplus in transgenic plants (Arabidopsis thaliana) eng
dc.type Tese por
dc.contributor.advisor-co1 Otoni, Wagner Campos
dc.contributor.advisor-co1Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786133Y6 por
dc.contributor.advisor-co2 Viloria, Marlene Isabel Vargas
dc.contributor.advisor-co2Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781964E6 por
dc.publisher.country BR por
dc.publisher.department Biotecnologia, diagnóstico e controle de doenças; Epidemiologia e controle de qualidade de prod. de por
dc.publisher.program Doutorado em Medicina Veterinária por
dc.publisher.initials UFV por
dc.subject.cnpq CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::MEDICINA VETERINARIA PREVENTIVA por
dc.creator.lattes http://lattes.cnpq.br/4999231814389477 por
dc.contributor.advisor1 Salcedo, Joaquín Hernán Patarroyo
dc.contributor.advisor1Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783313T4 por
dc.contributor.referee1 Bechara, Gervásio Henrique
dc.contributor.referee1Lattes http://lattes.cnpq.br/2382374201685423 por
dc.contributor.referee2 Passos, Flávia Maria Lopes
dc.contributor.referee2Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781817D3 por
dc.contributor.referee3 Portela, Ricardo Wagner Dias
dc.contributor.referee3Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4794528D3 por
dc.contributor.referee4 Oliveira, Leandro Licursi de
dc.contributor.referee4Lattes http://lattes.cnpq.br/0578231392218162 por


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  • Medicina Veterinária [520]
    Teses e dissertações defendidas no Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária

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