Uso de dimetil-formamida associada ou não ao glicerol na criopreservação de sêmen caprino

Abstract

O objetivo neste trabalho foi avaliar os efeitos da dimetil-formamida na criopreservação de sêmen caprino, por meio de testes in vitro. As partidas de sêmen foram congeladas com os diluidores leite desnatado-gema, associado a diferentes crioprotetores e concentrações: 7% de glicerol (T1); 3,5% de glicerol e 3,5% de dimetil-formamida (T2) e 5% de dimetil-formamida (T3). O sêmen foi centrifugado e envasado em palhetas de 0,5 mL, sendo resfriado por 40 minutos, atingindo 5,0°C e permanecendo nesta temperatura por mais 1 hora e 20 minutos. Os parâmetros avaliados in vitro foram a motilidade progressiva e o vigor espermático, a integridade acrossômica, a integridade da membrana plasmática (HO) e a reação acrossômica. Observou-se perda de 30,0% da motilidade inicial quando as amostras foram submetidas aos procedimentos de criopreservação. A perda de integridade da membrana plasmática, avaliada pelo teste hiposmótico (HO) foi de 19%. As lesões de acrossoma aumentaram em 3% durante o teste de termo-resistência (TTR) lento. Não houve diferença entre os tratamentos quanto aos aspectos de motilidade nos tempos de 0,00; 0,05; e 1,00 horas do TTR e vigor em todos os tempos. No tempo de 2,00 horas do TTR, registrou-se diferença entre os tratamentos 1 e 2, de modo que a motilidade no tratamento 2 foi superior às demais. Os valores de integridade de membrana plasmática, integridade acrossômica e reação acrossômica pós-descongelamento não diferiram entre os tratamentos, indicando que a dimetil-formamida não foi superior ao glicerol na manutenção da qualidade espermática após a criopreservação.

The objective of this trial was to evaluate the efficiency of dimethylformamide on cryopreservation of goat semen using semen physical analyses and complementary tests. Alpine and Saanen bucks from the Dairy Goat Experimental Station- DZO were used. Semen samples were frozen with a yolk-skimmed milk diluent and cryoprotectors with different concentrations as follows: 7% glycerol (T1), 3.5% glycerol plus 3.5% dimethylformamide (T2) or 5% dimethylformamide (T3). Semen was centrifuged, diluted, and bottled in 0.5 mL straws followed by cooling for 40 minutes until reach 5.0°C and kept at this temperature for additional 80 minutes. Samples were then exposed to liquid nitrogen vapor for 15 minutes and finally frozen. Thawing was done in a waterbath at 37°C for 50 seconds. The following variables were evaluated in vitro: sperm progressive motility and vigor, acrosomal integrity and reaction, and plasmatic membrane integrity. The cryopreservation procedures reduced 30.0% of the initial motility and 19% of plasmatic membrane integrity that was evaluated using the hyposmotic swelling test (HOST). It was observed an increaseof 3% in acrosomal lesions when samples were submitted to a slow thermoresistance test (TRT). No significant differences in sperm motility were observed among treatments at 0, 5, and 60 minutes of TRT as well as in sperm vigor at all TRT times. However, at 120 minutes of TRT a significant difference in sperm motility was found comparing T1 and T2 while T3 was intermediate. There were no significant differences on plasmatic membrane integrity, acrosomal integrity, and post-thawing acrossomal reaction across treatments. It can be concluded that dimethylformamide can be a viable alternative for goat semen cryopreservation used alone or in association with glycerol.