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Coleta e criopreservação do sêmen de rã-touro, Lithobastes catesbeianus (Shaw, 1802)

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dc.creator Calado, Leonardo Luiz
dc.date.accessioned 2015-03-26T13:02:54Z
dc.date.available 2011-06-07
dc.date.available 2015-03-26T13:02:54Z
dc.date.issued 2009-02-26
dc.identifier.citation CALADO, Leonardo Luiz. Seminal sampling and cryopreservation in the bullfrog, Lithobastes catesbeianus (Shaw, 1802). 2009. 75 f. Dissertação (Mestrado em Biologia e Manejo animal) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2009. por
dc.identifier.uri http://locus.ufv.br/handle/123456789/2221
dc.description.abstract O impacto da introdução de espécies exóticas no Brasil e no mundo, é um grande problema ao desequilíbrio ambiental. O estudo de métodos para otimizar e melhorar a permanência das espécies nativas em declínio e utilizar o potencial das espécies exóticas para o fornecimento de alimentos sem prejuízo ao meio, tem sido um desafio para as atividades de produção animal e conservação das espécies. O objetivo do presente estudo foi desenvolver um protocolo de espermiação induzida em rã-touro, seguido de criopreservação seminal. Três experimentos foram conduzidos na Universidade Federal de Viçosa e Universidade Federal de Lavras, estado de Minas Gerais. O primeiro experimento avaliou-se a indução da espermiação com extrato bruto hipofisário (EBH &#8211; 5000 &#956;g/kg), acetato de buserelina (AB &#8211; 13 &#956;g/kg), acetato de gonadorelina (AG &#8211; 83 &#956;g/kg) e gonadotropina coriônica humana (hCG &#8211; 830 UI/kg). Trinta machos de rã-touro foram induzidos com esses hormônios e o sêmen coletado por 12 horas. Parâmetros espermáticos (motilidade, volume, cor, vigor, odor, concentração) foram observados para se obter o melhor hormônio indutor. No segundo experimento a influência do período após indução sobre as características seminais foi avaliada. Outro grupo de machos (n=30) foi induzido com o melhor hormônio obtido do experimento anterior e amostras foram coletadas em duas, quatro, seis, oito, dez e dose horas após a primeira aplicação. No terceiro experimento a toxicidade e a criopreservação com crio-soluções compostas por DMSO (1,0; 2,5; 5,0; 7,5%) e metanol (1,0; 2,5; 5,0; 7,5%) como crioprotetores internos e Lactose e BTS a 1 e 5% foram avaliadas respectivamente. O sêmen foi diluído nas criosoluções e a motilidade espermática, vigor e duração do tempo (n=11) foram avaliados. O sêmen foi congelado utilizando-se as mesmas soluções crioprotetoras e os parâmetros seminais pósdescongelamento, também, foram observados. Os dados foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis e submetidos à análise de variância e de regressão (P<0.05). Somente o AG e AB induziram a espermiação, onde 100% e 20% dos machos liberaram sêmen, respectivamente. O período após indução afetou o volume (y = 0,1084x + 1,1527; R2 = 0,37) e não afetou os outros parâmetros. A motilidade espemática foi afetada pelo metanol (92,1 ± 8,0%) ou DMSO (89,0 ± 3,0%), embora o vigor (4,2 ± 0,1 e 3,6 ± 0,5) e a duração da motilidade (287 ± 10s and 252 ± 23s), mostraram efeito significativo. O metanol associado ao BTS 5% e lactose 1% influenciou o parâmetro motilidade. A motilidade pós- descongelamento indicou que nenhuma das soluções mantivera a motilidade espermática. A extração seminal pode ser realizada com o acetato de gonadorelina até 10 horas após a primeira aplicação. pt_BR
dc.description.abstract The impact caused by alien species in Brazil and over the world presents consequences for native populations of frogs. The development of methodologies to preserve the native species and optimize the food production is a challenging task for aquaculture. The aim of the present study was to develop a protocol of induced spermiation in the bullfrog Lithobastes catesbeianus followed by sperm cryopreservation. Three experiments were conducted at Universidade Federal de Lavras and Universidade Federal de Viçosa, Minas Gerais State. The first experiment aimed to evaluate the induced spermiation using carp crude pituitary gland (CPE &#8211; 5000 &#8211; &#956;g/kg), buserelin acetate (BA &#8211; 13 &#956;g/kg), gonadorelin acetate (GA &#8211; 83 &#956;g/kg), and human chorionic gonadotropin (hCG &#8211; 830 IU/kg). Thirty males were induced with the mentioned hormones followed by sperm sampling hours afterwards. Sperm parameters (sperm motility, volume, color, vigor, odor, concentration) were compared in order to obtain the best hormone inducer. In the experiment 2, we aimed to evaluate the influence of the period after inducement on sperm traits. Another group of males (n=30) were induced using the best procedure obtained above and then the sperm was sampled at 2, 4, 6, 8, 10 and 12 hours afterwards. In the experiment 3, we have evaluated the toxicity and cryopreservation success using cryo-solutions composed by DMSO (at 1,0; 2,5; 5,0 and 7,5%) and methanol (at 1,0; 2,5; 5,0 e 7,5%) as the main cryoprotectants; and BTS at 1 or 5%. Sperm was diluted using the cryo-solutions and then observed the motility parameters (sperm motility, VIGOR and duration; n=11). The sperm was also cryopreserved using the same cryo-solutions and cooled in vapour nitrogen vessel (dry-shipper), and then observed the post-thawed sperm parameters. Data were compared by Kruskal-Walis test and Anova followed by regression analysis (P<0.05). Our results indicate that only AG and AB succeed to induce spermiation, where 100% and 20% of the males released the sperm, respectively. The period after inducement have influenced the sperm parameters of volume (y = 0,9727 + 01327x; R2 = 0,50) and concentration (y = -0,1784x + 2,5878; R2 = 0,86), although there was not a significant effect for other parameters. Regarding the toxicity of the cryoprotectants, the sperm motility did not show a significant effect with methanol (92,1 ± 8,0%) or DMSO (89,0 ± 3,0%), although sperm vigor (4,2 ± 0,1 and 3,6 ± 0,5) and the duration of motility (287 ± 14 10s and 252 ± 23s, respectively) showed a significant effect. A clear interaction was observed on motility parameters when methanol at 1% was associated with BTS at 5% and lactose at 1%. Similar trend was observed when DMSO or methanol was associated with lactose or BTS. Data regarding the post-thawed motility indicate that none of the cryosolutions succeed in maintain the sperm motility. In conclusion, the sperm sampling was optimized using gonadorelin acetate followed by sperm sampling 10 hour afterwards. Other investigations are stil necessary in order to improve the cryopreservation success. eng
dc.description.sponsorship
dc.format application/pdf por
dc.language por por
dc.publisher Universidade Federal de Viçosa por
dc.rights Acesso Aberto por
dc.subject Indução hormonal por
dc.subject Criopreservação seminal por
dc.subject Motilidade por
dc.subject Rã-touro por
dc.subject Hormonal induction eng
dc.subject Sperm cryopreservation eng
dc.subject Motility eng
dc.subject Bullfrog eng
dc.title Coleta e criopreservação do sêmen de rã-touro, Lithobastes catesbeianus (Shaw, 1802) por
dc.title.alternative Seminal sampling and cryopreservation in the bullfrog, Lithobastes catesbeianus (Shaw, 1802) eng
dc.type Dissertação por
dc.contributor.advisor-co1 Santos, Luiz Carlos dos
dc.contributor.advisor-co1Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781093D8 por
dc.contributor.advisor-co2 Murgas, Luis David Solis
dc.contributor.advisor-co2Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4796970J8 por
dc.publisher.country BR por
dc.publisher.department Biologia e Manejo animal por
dc.publisher.program Mestrado em Biologia Animal por
dc.publisher.initials UFV por
dc.subject.cnpq CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::ZOOLOGIA::ZOOLOGIA APLICADA::CONSERVACAO DAS ESPECIES ANIMAIS por
dc.creator.lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4755040D4 por
dc.contributor.advisor1 Ribeiro Filho, Oswaldo Pinto
dc.contributor.advisor1Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4727572J2 por
dc.contributor.referee1 Zanuncio, José Cola
dc.contributor.referee1Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4787556T2 por
dc.contributor.referee2 Seixas Filho, José Teixeira de
dc.contributor.referee2Lattes http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782867P1 por


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  • Biologia Animal [157]
    Teses e dissertações defendidas no Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal

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