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dc.contributor.authorFontenelle, Mariana Rodrigues
dc.date.accessioned2015-03-26T13:07:25Z-
dc.date.available2006-12-14
dc.date.available2015-03-26T13:07:25Z-
dc.date.issued2006-02-22
dc.identifier.citationFONTENELLE, Mariana Rodrigues. Functional characterization of a putative nucleoporin-like protein interacting with the geminivirus protein NSP. 2006. 79 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica e Biologia molecular de plantas; Bioquímica e Biologia molecular animal) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2006.por
dc.identifier.urihttp://locus.ufv.br/handle/123456789/2399-
dc.description.abstractA família Geminiviridae é uma diversa família de vírus de planta. O Cabbage leaf curl virus (CaLCuV) do gênero Begomovirus possui dois componentes genômicos de DNA fita simples, DNA-A e DNA-B. O DNA-A é requerido para a replicação, ativação transcricional e encapsidação do vírus. O DNA-B é requerido para movimento, sendo que a proteína NSP, codificada pelo mesmo, transporta o DNA viral do núcleo para o citoplasma. Já foi demonstrado que NSP interage com proteínas do hospedeiro, como uma proteína receptora Ser/Tre quinase, denominada NIK ( NSP-interacting kinase ). Nesse estudo foi realizado uma triagem de proteínas que interagem com NSP de CaLCuV, através de um sistema duplo híbrido em leveduras, utilizando uma biblioteca de cDNA de Arabidopsis, e foi isolada uma nucleoporina-like, referida como NAP ( NSP-Associated Protein ). Além disso, foi comprovado que a interação NAP-NSP também ocorre in vitro. A proteína completa, codificada pelo gene At4g13350 possui dois homólogos em Arabidopsis com funções ainda desconhecidas, o At1g08680 e At4g32630. Foi identificado um homólogo em humanos, a proteína hRip, que interage com a proteína Rev de HIV. Para se entender a importância da interação de NAP-NSP, foi identificado um mutante para o gene NAP e foram selecionadas linhagens mutantes homozigotas de Arabidopsis por PCR. A inativação do gene NAP foi confirmada por um RT-PCR, comprovando ser um alelo nulo. Plantas de Arabidopsis selvagens da linhagem Col-0 e mutantes nap foram inoculadas com CaLCuV DNA-A e DNA-B. Ambas as linhagens Col-0 e nap desenvolveram os sintomas típicos de CaLCuV com intensidades semelhantes. A inativação do gene NAP parece não influenciar na infecção do vírus CaLCuV em Arabidopsis, talvez pela presença de homólogos que possam estar desempenhando o papel de NAP ou talvez pela interação NAP-NSP não ser essencial na infecção viral. Estudos em plantas superexpressando o gene NAP foram realizados, constatando que essas plantas apresentaram um discreto aumento na susceptibilidade ao vírus, mostrando sintomas mais severos e maior número de plantas infectadas, comparadas às plantas selvagens.pt_BR
dc.description.abstractThe family Geminiviridae is a diverse family of plant virus. The Cabbage leaf curl virus (CaLCuV) of Begomovirus genus possess two genomic components of singlestranded DNA, DNA-A and DNA-B. The DNA-A is required for replication, transactivaction and encapsidation of the viral genome. The DNA-B is required for the virus movement, in which NSP is coded. NSP transports the viral DNA from the nucleus to the cytoplasm and has been demonstrated to interact with a plasma membrane receptor-like kinase, designated NIK (NSP-interacting kinase). In this study, we performed a two-hybrid screening for CaLCuV NSP-interacting proteins, using a cDNA library from Arabidopsis and we isolated a nucleoporin-like protein, designated NAP (NSP-Associated Protein). Further more, it was proved in vitro assays that these proteins interact with each other. The full-length protein, which is encoded by the At4g13350 gene, possess two NAP homologues of unknown functions, At1g08680 and At4g32630 (33% and 31% sequence identity, respectively), in the Arabidopsis genome. Other homologue is human Rip protein that interacts with the HIV Rev protein. To assess directly the significance of NAP-NSP interaction, we identified a mutant in the NAP gene and selected for homozygous Arabidopsis mutant line by PCR. The inactivation of this gene was confirmed by RT-PCR, confirming it is null allele. Wild type Col-0 plants and nap mutant lines were inoculated with CaLCuV DNA-A and DNA-B. Both Col-0 and nap lines developed typical symptoms of CaLCuV infection at similar intensity. Inactivation of the NAP gene does not seem to affect CaLCuV infection in Arabidopsis. These results indicate that either the NAP-NSP interaction is not required for NSP function or the NAP homologs are functionally analogs that are capable to replace the NAP role in the null allele mutant. Over expressing NAP plants were also inoculated with the virus CaLCuV, and presented a discrete increase in plant susceptibility, showing more severe symptoms and higher percentage of infected plants compared with wild type.eng
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
dc.formatapplication/pdfpor
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Viçosapor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.subjectNucleoporinapor
dc.subjectProteína NSPpor
dc.subjectGeminivíruspor
dc.subjectNucleoporineng
dc.subjectNSP proteineng
dc.subjectGeminiviruseng
dc.titleCaracterização funcional de uma provável nucleoporina que interage com a proteína NSP de geminivíruspor
dc.title.alternativeFunctional characterization of a putative nucleoporin-like protein interacting with the geminivirus protein NSPeng
dc.typeDissertaçãopor
dc.contributor.authorLatteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4776531J2por
dc.publisher.countryBRpor
dc.publisher.departmentBioquímica e Biologia molecular de plantas; Bioquímica e Biologia molecular animalpor
dc.publisher.programMestrado em Bioquímica Agrícolapor
dc.publisher.initialsUFVpor
dc.subject.cnpqCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULARpor
dc.contributor.advisor1Fontes, Elizabeth Pacheco Batista
dc.contributor.advisor1Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781848H2por
dc.contributor.referee1Pereira, Maria Cristina Baracat
dc.contributor.referee1Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4780021E6por
dc.contributor.referee2Loureiro, Marcelo Ehlers
dc.contributor.referee2Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4780851Y3por
dc.contributor.referee3Fietto, Juliana Lopes Rangel
dc.contributor.referee3Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4790238D0por
dc.contributor.referee4Zerbini Júnior, Francisco Murilo
dc.contributor.referee4Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783743U5por
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