Morfologia do intestino e recuperação de DNA do conteúdo intestinal de larvas e adultos de Oxelytrum discicolle (BRULLÉ, 1840) (COLEOPTERA: SILPHIDAE)

Abstract

Oxelytrum discicolle é um besouro necrófago estudado pela entomologia forense com ampla distribuição na América do sul. Possui três instares larvais e tanto as larvas quanto os adultos se alimentam de carcaças. O intestino dos insetos é um órgão amplamente estudado e suas características podem variar de acordo com o hábito alimentar e a história evolutiva de cada grupo. A partir das características do intestino é possível estabelecer aplicações na entomologia forense. Em situações onde a identificação da vítima e do autor não são possíveis, analisar o conteúdo presente no intestino permite a recuperação do DNA do cadáver do qual os insetos se alimentaram. O objetivo deste trabalho foi analisar a morfologia do intestino de larvas e adultos e recuperar o DNA presente no conteúdo intestinal de larvas e adultos de O. discicolle. Larvas e adultos foram dissecados, e o intestino analisado em microscopia de luz e eletrônica de varredura. Foram observadas poucas diferenças entre os instares larvais, com presença de criptas regenerativas e grande quantidade de secreção no lúmen do intestino médio. Entre machos e fêmeas também não há diferenças significativas. Os adultos possuem cecos no intestino médio que assumem tanto a função regenerativa quanto as funções de secreção de enzimas e absorção de nutrientes. Para a detecção de DNA larvas e adultos alimentados com carne suína foram dissecados e, tanto o intestino inteiro, quanto o conteúdo intestinal, passaram por processo de extração e amplificação do DNA. A taxa de detecção geral foi de 31,3% das amostras. A taxa de detecção foi maior nas larvas em relação aos adultos. Os resultados deste trabalho mostram que O. discicolle possui as características do intestino semelhantes as demais espécies de Coleoptera corroborando com a hipótese de que o a morfologia do intestino dos insetos é um padrão herdado, sendo moldada pela evolução dos grupos. Além disso, analisando o conteúdo intestinal de O. discicolle é uma espécie que pode ser utilizada na recuperação de DNA em seu conteúdo intestinal quando encontrada em locais de crime. Palavras-chave: Entomologia Forense. Histologia. Entomogenética.

Oxelytrum discicolle is a necrophagous beetle studied by forensic entomology with wide distribution in the Neotropical region. It has three larval instars and both larvae and adults feed on carcasses. The insect gut is a widely studied organ and its characteristics may vary according to the eating habits and evolutionary history of each group. From the characteristics of the gut, it is possible to establish applications in forensic entomology. In situations where the identification of the victim and the perpetrator are not possible, analyzing the contents present in the gut allows the recovery of the corpse’s DNA on which the insects fed on. The objective of this study was to analyze the morphology of larvae and adults’ gut and recover the DNA present in the intestinal content of O. discicolle larvae and adults. Larvae and adults were dissected, the gut was analyzed by light microscopy and scanning electronics microscopy. Only a few differences were observed between larval instars, with the presence of regenerative crypts and a large amount of secretion in the midgut lumen. Between males and females, there were no significant differences either. Adults have cecum in the midgut that take on both the regenerative function and the functions of enzyme secretion and nutrient absorption. For the detection of DNA, larvae and adults that fed on pork were dissected and both the entire gut and the intestinal contents underwent a process of DNA extraction and amplification. The overall detection rate was in 31.3% of the samples. The detection rate was higher in larvae than in adults. The results of this study show that O. discicolle has gut characteristics similar to other Coleoptera species, confirming the hypothesis that insect gut morphology is an inherited pattern, being shaped by the evolution of groups. Also, by analyzing the intestinal content of O. discicolle, it is a species that can be used to recover DNA in its intestinal content when found in crime scenes. Keywords: Forensic Entomology. Histology. Entomogenetics.